Fast DNA Library Plus Prep Kit for MGI
使用说明书
【产品名称】
Fast DNA Library Plus Prep Kit for MGI
【货号/规格】
KM004-A（24 rxns）；KM004-B（96 rxns）；试用装（6 rxns）
【产品简述】
本试剂盒针对 MGI 高通量测序平台，提供了一管式便捷、通用的 DNA 文库构建方案，将片段化、末端补平和末端加 A 结合到一个步骤，大大缩短了建库的时间、减少了繁琐步骤造成的误差，片段化和末端修复后的产物可直接进行接头连接，不需额外纯化，后续操作和#KM001 Fast DNA Library Prep Kit for MGI操作相同。完整的文库定量可将文库稀释至合适浓度，用双链 DNA 荧光染料方法（如Thermo Qubit Flex Fluorometer）或 qPCR 绝对定量方法。
【样本类型】
表 1 常用DNA推荐投入量
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应用 |
样本类型 |
推荐投入量 |
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全基因组测序 |
高质量复杂基因组 |
50ng-1μg |
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全外显子靶向捕获测序 |
高质量复杂基因组 |
10ng-1μg |
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全基因组靶向捕获测序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
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全基因组测序 |
微生物基因组 |
1ng-1μg |
推荐使用 TE 或超纯水溶解 DNA 样品，如样品中含有 EDTA，则需磁珠纯化或加入一定体积的 Neutralization Buffer 中和。
【储存条件及有效期】
所有试剂均应保存于-20℃，Ligation Buffer 在低温下会有晶体析出，属正常现象， 应平衡至室温后使用，产品有效期为 12 个月。
【组成成分】
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组分 |
24 rxns |
96 rxns |
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FEP Buffer |
120 μl |
480 μl |
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FEP Enzyme Mix |
240 μl |
2×480 μl |
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Fast DNA Ligase |
120 μl |
2×240 μl |
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Fast Ligation Buffer |
600 μl |
4×600 μl |
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2× HIFI Library PCR Master Mix |
600 μl |
4×600 μl |
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Primer Mix for MGI * |
120 μl |
480 μl |
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Neutralization Buffer |
120 μl |
480 μl |
*FEP Buffer 为片段化、末端修复的反应 buffer，FEP Enzyme Mix 为片段化、末端修复相关酶混合物。
*若有多个样本，则推荐使用#KM002 和#KM003 接头引物组合，本试剂盒提供一套引物，引物序列如下：
5’-TGTGAGCCAAGGAGTTG-3’
5’-GAACGACATGGCTACGA-3’
备注：分选磁珠推荐使用#NC1011 GDSPure DNA Selection Magbeads 或 AMPure XP beads。